fa بررسی مولکولی ژن تولید کننده پروتئین فاز گرمایی 60 کیلو دالتونی در قارچ بیماری زای میکروسپوروم کنیس پزشکی Medicine پژوهشی Original سابقه و هدف: پروتئین های شوک گرمائی (Heat Shock Proteins یا به اختصار HSPs) به عنوان Chaperone های مولکولی عمل کرده و از طریق تنظیم تا خوردگی و انتقال درون سلولی پروتئین های تازه سنتز شده، سلول را در مقابل صدمات ناشی از استرس های محیطی، محافظت می کنند. این مطالعه با هدف مشخص کردن ژن HSP60 در درماتوفیت پاتوژن میکروسپوروم کانیس انجام شد مواد و روش ها: نمونه قارچ میکروسپوروم کانیس از بیماران مبتلا به درماتوفیتوزیس جمع آوری گردیده و در شرایط مناسب کشت داده شد. DNA با وزن ملکولی سنگین که از توده میسلیومی به دست آمد، با روش های استاندارد جدا شد. جفت پرایمرهایی با 21 نوکلئوتید از نواحی حفاظت شـده (highly conserved ) از ژن های HSP60 سایر سلـول های یوکاریـوت، طراحی شد. پرایمرهای ذکر شده به وسیله ی DNA ژنومی (template ) جدا شده از میکروسپوروم کانیس در PCR مورد استفاده قرار گرفت. مولکول های پیش بینی شده، تقویت شدند و برای تعیین سکانس فرستاده شدند. یافته ها: توالی نوکلئوتیدی ژن HSP60 به دست آمده شامل 1550 نوکلئوتید است که پروتئینی با 497 آمینواسید را رمز می نماید. نتیجه گیری: در مطالعه حاضر، ما هویت و خصوصیت مولکولی یک ژن از میکروسپوروم کنیس که کدکننده یک پروتئین متعلق به خانواده ی پروتئین شوک حـرارتی 60 کیـلو دالتـونی ملقب به McHSP60 می باشـد را بررسـی کرده ایم. آنالیـز سکانس آمینواسیدی این ژن شباهت قابل توجهی با HSP60 سایر یوکاریوت ها نشان می دهد، چنان که بیش از 97% با C.immitis ، 92% با Aspergillus fumigatus و 74% با S.cerevisiae همولوژی دارد. تجزیه و تحلیل ترکیب آمینواسیدی در HSP60 بیانگر غنی بودن آن از آلانین، گلوتامیک اسید و گلایسین است. ترکیب آمینواسیدی McHSP60 نشان دهنده ناچیز بودن مقدار سیستئین و تریپتوفان در آن می باشد Background: The stress-inducible Heat Shock Proteins (i.e. HSP60) constitute one of the highly conserved protein and gene families. As one of the molecular chaperone proteins, they play essential roles in protein metabolism and protein translocation under both stress and non-stress conditions. In the present study, we try to characterize the 60 kDa Heat Shock Protein (HSP60) gene in dermatophyte pathogen Microsporom Canis (M. canis). This dermatophyte is one of the most important causative agents of dermatophytosis in human and animals. Some properties of M. canis have been investigated in molecular level however, no information is available regarding the HSP60 in this dermatophyte. In the present study, we try to characterize the 60 kDa Heat Shock Protein (HSP60) gene in dermatophyte pathogen Microsporom Canis (M. canis). Materials and Methods: M. canis was obtained from patients with dermatophytosis and cultured in appropriate conditions. High molecular weight DNA was isolated from obtained mycelial mass by standard methods. Pairs of 21 nt primers were designed from highly conserved regions of the HSP60 genes in other eukaryotic cells. Mentioned primers were utilized in PCR using isolated genomic DNA template of M. canis. Predicted molecules have been amplified and were submitted for sequencing. Results: By the time 1550 nucleotides of this gene are sequenced and analysed, that encoding a 497 amino acids protein. Conclusion: In the present study, we report the identification and molecular characterization of a M. canis gene encoding a protein belongs to the 60 kDa Heat Shock Protein family which will here be referred to as McHSP60. Analysis of the amino acid sequence of this gene revealed a considerable identity with other eukaryotic HSP60 such as those of C.immitis (97%), Aspergillus fumigatus (92%) and S.cerevisiae (74%). Investigation of amino acid composition in HSP60 revealed Alanine, Glutamic acid and Glysine as the most common amino acids in this protein. The amino acid composition of McHSP60 indicates the amount of Cysteine and Tryptophan are poor. درماتوفیت , میکروسپوروم کانیس , PCR , کاپرون , HSP Dermatophyte , Microsporom canis , PCR , Chaperone , HSP 513 519 http://pajoohande.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-8&slc_lang=fa&sid=1 Motavaze K دکتر کامیار متواضع 1900319475328460011968 1900319475328460011968 No دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال Jahangirnejad A آریو جهانگیرنژاد ajahangirnejad@yahoo.com 1900319475328460011969 1900319475328460011969 Yes دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Emami M دکتر مسعود امامی 1900319475328460011970 1900319475328460011970 No دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال Yasharal D دیـویـد یـاشـارال 1900319475328460011971 1900319475328460011971 No دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال Rezaiee S دکتر ساسان رضائی 1900319475328460011972 1900319475328460011972 No دانشکده بهداشت ، دانشگاه علوم پزشکی تهران