fa غربال‌گری کاندیدا تروپیکالیس se29w، جدا شده از پساب کارخانه تولید لاستیک، با توان بالقوه‌ی زیست پالایی سلنیت سمی پزشکی Medicine پژوهشی Original <p dir="RTL"><strong>چکیده</strong></p> <p dir="RTL"><strong>سابقه و هدف: </strong>مواجهه‌ی دراز مدت با غلظت‌های بالای سلنیت می‌تواند به بروز ناراحتی‌های پوستی، از دست رفتن مو، تغییر شکل ناخن ها، نکروز کبد و کلیه، اشکالات تنفسی و در نهایت مرگ سلولی منجر شود. در این راستا، جداسازی و تعیین هویت ملکولی مخمرهای بومی مقاوم به سلنیت، بعنوان کاتالیست<span dir="LTR">‌</span>های ایمن طبیعی و مناسب در آزمایشات زیست پالایی اکسی‌ آنیون سمی سلنیت مورد توجه قرار گرفت.</p> <p dir="RTL"><strong>مواد و روش‌ها:</strong> در این مطالعه‌ی تجربی، پس از نمونه‌برداری از حوضچه‌های جمع‌آوری پساب و لجن فعال، غربال‌گری اولیه براساس جداسازی در محیط کشت انتخابی کلرامفنیکل رزبنگال آگار غنی شده با سلنیت انجام شد. ارزیابی الگوی تحمل‌پذیری ذاتی سویه‌های غربال‌گری شده نسبت به سلنیت با استفاده از روش‌های رقت در آگار و دیسک دیفیوژن آگار انجام شد. زمان دو برابر شدن سلول‌ها و تعیین درصد بازدارندگی رشد سویه<span dir="LTR">‌</span>های مخمری مقاوم با ترسیم منحنی‌های استاندارد رشد در حضور سلنیت مورد سنجش قرار گرفت. برای ارزیابی حذف میکروبی سلنیت از تکنیک کالریمتری با کمک معرف 3و3- دی آمینو بنزیدین هیدروکلراید استفاده شد. تعیین هویت سویه مخمری کارآمد بر مبنای آنالیزهای فنوتیپی و فیلوژنتیکی انجام شد.</p> <p dir="RTL"><strong>یافته‌ها:</strong> در مجموع 32 جدایه مخمری مقاوم به سلنیت از نمونه‌های پساب و لجن فعال جدا گردید. براساس نتایج الگوی تحمل‌پذیری و تأیید نتایج به کمک کدورت به<span dir="LTR">‌</span>دست آمده از رسم منحنی‌های رشد، سویه <span dir="LTR">se29w</span> (جدا شده از پساب کارخانه تولید لاستیک) با ماکزیمم تحمل پذیری 18 گرم در لیتر نسبت به یون سمی سلنیت، به<span dir="LTR">‌</span>عنوان سویه<span dir="LTR">‌</span>ی کارآمد تحت نام <em>کاندیدا تروپیکالیس</em> مورد شناسایی ملکولی قرار گرفت و در بانک ژنی با شماره شناسایی <span dir="LTR">KR150680</span> ثبت شد. همچنین در این پژوهش مشخص شد مخمر بومی مذکور قادر است سلنیت سمی را به سلنیوم احیا کند. در ادامه‌ی این پژوهش، از سلول‌های در حال استراحت مخمر مذکور به<span dir="LTR">‌</span>عنوان کاتالیست زیستی جهت آزمایشات سلنیت زدایی استفاده شد که براساس نتایج پس از 60 ساعت گرماگذاری، کاهش 5/92 درصدی از سلنیت موجود در محیط زیست تبدیلی با غلظت اولیه یک گرم در لیتر تحت شرایط دمایی 30 درجه سانتی‌گراد، <span dir="LTR">pH</span> برابر 2/7 و غلظت 20 گرم در لیتر وزن تر توده سلولی مشاهده شد.</p> <p><strong><span dir="RTL">نتیجه‌گیری: </span></strong><span dir="RTL">در این مقاله برای نحستین بار حذف و احیای سلنیت در گونه‌ی مخمری <em>کاندیدا تروپیکالیس</em> گزارش شد. روش‌های غربال‌گری پیشنهاد شده در پژوهش اخیر، می‌تواند ما را در انتخاب هدفمند کاتالیست‌های میکروبی کارآمد برای آزمایشات زیست‌پالایی سلنیت، در جهت ارتقای سلامت و حفظ محیط زیست یاری کند.</span></p> <p><strong>Abstract:</strong></p> <p><strong>Background and Aim:</strong> Contamination of soil and water resources with selenium oxyanions is a serious public health and environmental threat. Long-term exposure to high selenite concentrations can result in skin disorders, hair loss, liver and kidney necrosis, breathing problems, deformed nails and cell death.&nbsp; In this regard, isolation and identification of indigenous selenite-resistant yeast strains can be used as safe and natural catalysts in the bio-remediation of the toxic selenite (SeO₃^-2).</p> <p><strong>Materials and Methods:</strong> In this experimental study, collected wastewater effluent and activated sludge samples are cultured into the selective Rose Bengal Chloramphenicol Agar medium containing selenite for selective screening of target strains of yeast. Agar dilution method and disk diffusion testing was performed to determine the intrinsic tolerance isolated yeast strains to selenite. The doubling time and the percentage of growth inhibition of the resistant isolated yeast strains in the presence of selenite were determined from standard growth curves. A colorimetric method using 3, 3-Diaminobenzidine hydrochloride has been developed for the microbial selenite removal. Phenotypic and phylogenetic analyses were used in the characterization of the potent yeast strain.</p> <p><strong>Results:</strong> Confirmation of the results from selenite tolerance pattern was performed on turbidity growth curves of the isolated yeast strains. The results showed that the strain se29w, isolated from waste rubber plant, exhibited maximum tolerance of 18 g/l to selenite. The strain se29w was classified as Candida tropicalis (GenBank accession number KR150680).&nbsp; Reduction of selenite to elemental red selenium was also observed in the strain se29w.&nbsp; Based on the results of selenite removal experiments, the resting cells of C. tropicalis se29w is capable remove 92.5% of selenite with initial concentration of 1 g/l at 30 C, pH 7.2, agitation 180 rpm, 20 g/l of wet biomass and after 60h incubation.</p> <p><span dir="RTL">&zwj;</span><strong>Conclusion</strong><strong>: </strong>The present research is the first report on the removal and reduction of selenite with <em>C. tropicalis</em>. The current project have proposed a variety of screening methods for identifying targeted microbial catalysts for bio-remediation of selenite and to improve environmental and human health.</p> سلنیت, زیست پالایی, رقت در آگار, دیسک دیفیوژن آگار, سلول در حال استراحت, کاندیدا تروپیکالیس Selenite, Bio-remediation, Agar dilution method, Disk diffusion test, Resting cell, C. tropicalis strain se29w 40 51 http://pajoohande.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-945&slc_lang=fa&sid=1 Morahem Ashengroph مراحم آشنگرف m.ashengroph@uok.ac.ir 190031947532846009217 190031947532846009217 Yes Razieh Arjmand راضیه ارجمند 190031947532846009218 190031947532846009218 No