fa تشخیص سیانوباکتریهای تولیدکننده‌ی میکروسیستین در تالاب انزلی با استفاده از روش PCR پزشکی Medicine پژوهشی Original سابقه و هدف: شکوفایی سیانوباکتری‌ها در آب‌های سطحی منجر به تولید سیانوتوکسین‌های خطرناکی مثل میکروسیستین می‌شود که مشکلات قابل توجهی ایجاد می‌کنند. در مطالعه‌ی حاضر، از یک آزمون PCR بهینه شده برای شناسایی سیانوباکتری‌های تولید‌کننده‌ی میکروسیستین موجود در تالاب انزلی استفاده شده است. مواد و روش‌ها: نمونه‌گیری آب از 20 ایستگاه واقع در نواحی شرقی، مرکزی و غربی تالاب انزلی صورت گرفت. استخراج DNA با استفاده از کیت DNG-Plus انجام گرفت. آزمون PCR برای پرایمرهای جهانی سیانوباکتری‌ها (23S30R و CYA106F) و پرایمر اختصاصی ژن کُدکننده‌ی میکروسیستین (mcyA-Cd1F و mcyA-Cd1R) بهینه شده و حساسیت و اختصاصیت آن ارزیابی گردید. سپس، آزمون PCR بهینه شده برای نمونه‌های تالاب انزلی به کار گرفته شد. فرایند کلونینگ محصولات PCR با توجه به رهنمودهای سازنده‌ی کیت انجام گرفت. یافته‌ها: مناسب‌ترین دما برای مرحله‌ی انیلینگ، واکنش 56 درجه سانتی‌گراد بود. بیشترین میزان تکثیر DNA زمانی در غلظت 4/0 میکرومولار پرایمرها مشاهده شد. به کارگیری آزمون PCR بهینه شده روی نمونه‌های تالاب انزلی آشکار کرد که همه‌ی ایستگاه‌‌های مورد مطالعه، آلوده به سیانوباکتری بودند که از بین آنها، سیانوباکتری‌های تولید کننده‌ی میکروسیستین در 10 ایستگاه حضور داشتند. محصولات PCR با موفقیت کلون شده و برای مطالعات آتی ذخیره گردید. نتیجه‌گیری: ممکن است تالاب انزلی در معرض خطر غلبه سیانوباکتری‌ها قرار گرفته باشد. از آزمون PCR بهینه شده در این مطالعه می‌توان به عنوان یک ابزار کارآمد به منظور مونیتورینگ و کنترل سیانوباکتری‌ها، به خصوص جهت شناسایی سویه‌های تولید کننده‌ی میکروسیستین در تالاب‌ها و یا سایر منابع آبی استفاده کرد. Background and Aim: Production of dangerous cyanotoxins such as microcystin, resulted from cyanobacteria bloom in territorial waters, could cause worldwide issues. We optimized and implemented a PCR method for detection of microcystin-producing cyanobacteria in Anzali Lagoon. Materials and Methods: Sampling was performed from 20 stations within western, central and eastern parts of the Lagoon. DNA was extracted using DNG-Plus kits. Optimization of PCR test for two universal (23S30R, CYA106F) and two specific primers (mcyA-Cd1F, mcyA-Cd1R) achieved, and its sensitivity and specificity were evaluated. Moreover, the test was applied for samples from Anzali Lagoon. Results: Optimum PCR yield was obtained at 56 C, and in 0.4 μM concentrations of the primers. Optimized PCR method revealed, which cyanobacteria were present in samples from all of the studied stations of Anzali Lagoon. In addition, microcystin-producing cyanobacteria were observed in 10 out of 20 stations. ‍Conclusion: Anzali Lagoon may have been predominated by dangerous cyanobacteria, and our optimized PCR method can be exerted as an efficient tool for monitoring of microcystin-producing species of cyanobacteria in the lagoons and other water sources. آب, ایران, سیانوباکتری, میکروسیستین, واکنش PCR Cyanobacteria, Iran, Microcystin, Polymerase Chain Reaction, Water 99 106 http://pajoohande.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-834&slc_lang=fa&sid=1 Sam Massahi سام مساحی Sam.massahi@gmail.com 1900319475328460010536 1900319475328460010536 Yes No. 53, Mina Alley, Darband Ave., Ghods Sq., Tajrish, Tehran, Iran; Phone: +98 21 22723884, +98 9126873524 سام مساحی؛ شماره 53، کوچه مینا، خیابان دربند، میدان قدس، تهران؛ تلفن: 22723884 (021)، 09126873524 Mozhgan Emtyazjoo دکتر مژگان امتیازجو 1900319475328460010537 1900319475328460010537 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Hassan Shahhossieni دکتر حسن شاه‌حسینی 1900319475328460010538 1900319475328460010538 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران