fa بررسی تأثیر مایع فولیکولار انسانی حرارت دیده و محیط کشت MEM-α بر بلوغ و باروری اووسیت های نارس موش سوری پزشکی Medicine پژوهشی Original سابقه و هدف: القای رشد و تکامل اووسیت نارس در محیط آزمایشگاهی یکی از روش هایی است که اخیراً در فن آوری های کمک باروری توجه بسیاری از محققین را به خود جلب نموده است. این روش برای زنان مبتلا به سرطان و تخمدان پلی کیستیک حایز اهمیت است. علی رغم استفاده از محیط های کشت مختلف، تاکنون یک محیط مناسب ایده آل جهت کشت اووسیت های نارس گزارش نشده است. با توجه به گزارش مواردی از موفقیت و به منظور تعین تأثیر مایع فولیکولی انسانی (مشابه با محیطی که اووسیت را در داخل بدن در بر گرفته است) بر بلوغ و قدرت باروری اووسیت های نارس موش سوری این تحقیق انجام گرفت. مواد و روش ها: تحقیق با طراحی تجربی انجام گرفت. تخمدان موش های ماده 4 تا 6 هفته ای از نژاد NMARI پس از قطع نخاع گردنی در شرایط استریل خارج و پس‌ از شستشو، اووسیت های نارس جدا شده از آن به‌ سه گروه‌ تقسیم‌ گردیدند. در گروه‌ اول‌ تعداد 209 تخمک نارس در محیط کشت حاوی FCS20% ,MEM-&alpha;, hCG, rFSH، در گروه دوم، 203 اووسیت نارس در محیط کشت حاوی hHFF100% و در گروه سوم، 205عدد اووسیت نارس در محیط حاوی MEM-&alpha;، hCG، rFSH وhHFF 20% قرار داده شدند. اووسیت های نارس به مدت 24 ساعت در داخل انکوباتور قرار داده شده و روز بعد، مراحل بلوغ اووسیت به وسیله میکروسکوپ معکوس مورد بررسی قرار گرفت. اووسیت های بالغ در هر گروه به قطره های حاوی اسپرم انتقال پیداکردند و میزان تشکیل جنین های 2 سلولی پس از 24 ساعت در زیر میکروسکوپ معکوس ثبت شد. سپس داده ها با آزمون آماری مجذور کای آنالیز شدند. یافته ها: میزان بلوغ اووسیت ها در گروه دوم (7/83%) نسبت به گروه اول (8/59%) وگروه سوم (3/67%) از لحاظ آماری به طور معنی داری بالاتر بود (0005/0P<) و اختلاف بین گروه اول و سوم از نظر آماری معنی دار نبود (2/0P<). میزان تشکیل جنین های دو سلولی در گروه دوم (8/81%) نسبت به گروه سوم (3/54%) و گروه اول (2/47%) از لحاظ آماری به طور معنی داری (01/0P< و002/0 P<) بالاتر بود. اختلاف بین گروه اول و سوم از نظر آماری معنی دار بود (07/0P<.). نتیجه گیری: به نظر می رسد که مایع فولیکولی انسانی، به صورت حرارت دیده می تواند بر بلوغ اووسیت های نارس موش سوری و باروری آن ها و در نتیجه میزان تشکیل جنین های دو سلولی در محیط آزمایشگاهی تأثیر مثبتی داشته باشد. Background: Induction of in vitro maturation and development of immature oocyte is one of the methods that has been frequently used recently in artificial reproduction techniques and has drawn attention of many investigators. This method is useful especially in women who are affected by cancer and polycystic ovary syndrome. Despite using many types of in vitro media, an appropriate environment has not been reported yet. Present study has been designed to assess the effect of heated human follicular fluid (hHFF), which is similar to in vivo environment for oocyte, on the maturation and fertilization potential of mouse immature oocytes. Materials and Methods: This study was performed by experimental method. Healthy female mice, aged 4-6 weeks, were sacrificed via cervical dislocation and their ovaries were extracted under sterile conditions. After washing, the separated immature oocytes were divided into three groups: In the first group, 209 immature oocytes were placed in culture medium contained MEM-&alpha;, HCG, FSC 20%, and rFSH. In the second group, 203 immature oocytes were put in culture medium contained 100%hHFF. In the third group, 205 immature oocytes were placed in culture medium contained MEM-&alpha;, HCG, rFSH, and 20% hHFF. Immature oocytes were placed in an incubator for 24 hours. Then, the stages of oocyte maturation were assessed by invert microscope and mature oocytes in each group were transferred to sperm-contained drops. After 24 hr, rate of two-cell embryos was recorded using invert microscope. Data was analyzed by Chi square test. Results: Maturation rate of oocytes in the second group (83.7%) was significantly higher than first (59.8%) and third (67.3%) groups (P<0.0005). The difference between first and third groups was not statistically significant (P<0.2). The formation rate of two-cell embryo in the second group (83.1%) was higher than first (47.2%) and third (54/3%) groups (P<0.002 and P<0.01, respectively). The difference between first and third groups was not statistically significant (P<0.07). Conclusion: it seems hHFF could improve in vitro maturation and fertility potential of immature oocytes and consequently the formation rate of two-cell embryos in mice, in comparison with MEM-&alpha; even supplemented with 20%hHFF. اووسیت نارس , مایع فولیکولی , بلوغ , باروری Immature oocyte, Human follicular fluid , Oocyte maturation , Development 425 432 http://pajoohande.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-133&slc_lang=fa&sid=1 Abbaszadeh H حجت اله عباس زاده 1900319475328460011675 1900319475328460011675 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Fanaii GH دکتر سید غلامرضا فنائی 1900319475328460011676 1900319475328460011676 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Sadeghi Y دکتر یوسف صادقی 1900319475328460011677 1900319475328460011677 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Almasi F دکتر فریبا الماسی 1900319475328460011678 1900319475328460011678 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Hosseini A دکتر احمد حسینی prof_hosseini @ yahoo.com 1900319475328460011679 1900319475328460011679 Yes دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران