|
ارزیابی تاثیر pH در تکنیک بازیابی آنتی ژن در رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی
|
| شیرین کریمی*، محمدرضا عزیزی |
| دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران |
|
|
چکیده: (9463 مشاهده) |
| سابقه و هدف: بازیابی ژن تکنیکی است که در آن برشهای بافتی قبل از انجام مرحله اصلی رنگ آمیزی ایمونولوژیک در معرض حرارت بالا قرار داده می شوند. این روش در مورد بسیاری از آنتی بادیها باعث افزایش چشمگیر در شدت رنگ آمیزی می شود. مواد و روشها: با فرض آنکه pH محلول برروی شدت رنگ آمیزی آنتی ژنها تاثیر دارد، ما 9 آنتی بادی مختلف را در معرض سه بافر مختلف با سه pH متفاوت (70/2، 16/6 و 27/9) قرار دادیم. پس از انجام مراحل اولیه رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی بر روی برشهای پارافینه، بافتهایی که با فرمالین 10% فیکس شده بودند، در سه مرحله متفاوت با استفاده از سه بافر به نحو یکسانی به مدت 10 دقیقه در میکروویو حرارت داده شدند و سپس مرحله اصلی رنگ آمیزی ایمونولوژیگ انجام شد. اسلایدها توسط دو پاتولوژیست به صورت blind از نظر شدت رنگ آمیزی ارزیابی شد. یافته ها: نتایج نشان داد که آنتی ژنهای فوق الذکر از نظر شدت رنگ آمیزی در رابطه به pH سه الگوی متفاوت را نشان می دهند. گروه اول آنتی ژنهایی که در هر سه pH شدت رنگ آمیزی کما بیش یکسانی را نشان می دهند، گروه دوم آنتی ژنهایی که کاهش فاحشی را در شدت رنگ آمیزی در pH=6.16 نشان داده و در دو pH دیگر بیشترین شدت رنگ آمیزی را نشان می دهند و گروه سوم آنتی ژنهایی که بیشترین شدت رنگ آمیزی را در pH=9.27 نشان دادند. نتیجه گیری و توصیه ها: با توجه به نتایج فوق و مطالعات مشابهی که به طور گسترده در مورد عوامل تأثیر گذار در تکنیک بازیابی آنتی ژن صورت گرفته است، ضرورت استاندارد کردن این عوامل، از جمله حرارت و نیز pH کاملا مشخص می شود. به نظر می رسد pH=9.27 بافر مطلوبی از نظر افزایش شدت رنگ آمیزی در مورد بسیاری از آنتی ژنها باشد، البته بعضی از آنتی ژنهای هسته ای بیشترین شدت رنگ آمیزی را فقط در pH بسیار کم نشان می دهند. |
|
| واژه‌های کلیدی: بازیابی آنتی ژن، رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی، pH |
|
|
|
نوع مطالعه: پژوهشی |
موضوع مقاله:
پزشکی
دریافت: 1385/6/15 | پذیرش: 1396/12/16 | انتشار: 1396/12/16
|
|
|
|
|
|
|
| ارسال نظر درباره این مقاله |
|
|
|
